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应用案例 || 微生物土壤呼吸实验室测量方法及数据对比

来源:北京力高泰科技有限公司 发布日期:2025-02-13 17:27:03 浏览次数:341

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土壤呼吸,是指土壤中的植物根系、食碎屑动物、真菌和细菌等进行新陈代谢活动,消耗有机物,产生二氧化碳的过程。其中包括土壤中微生物分解有机物的过程。在这个过程中,需氧微生物消耗氧气,将有机物最终分解为二氧化碳和水。

——土壤微生物有氧呼吸是通过观测O2的消耗和/或CO2的释放来测量。

——土壤呼吸强度是评价土壤微生物总活性的重要指标,也可用于评价土壤肥力。


土壤呼吸体现了土壤承载包括作物、植物生长、土壤动物和微生物在内的土壤生命的能力。它是土壤健康的重要指标,体现了生物活性、土壤有机质和降解能力。尤其是在分解过程中,有机质所含的有机营养物质(如有机磷、氮和硫)转化为可供植物吸收的无机形式。

在实验室中,土壤呼吸被用来估算土壤微生物生物量。事实上,土壤呼吸表明土壤维持植物生长的能力。由于保护有机质的土壤团聚体遭到破坏,土壤通气性增加,导致耕作后过度呼吸和有机质分解。在缺乏额外投入的情况下,有机质减少、土壤聚集减少、植物和微生物可利用的养分有限,会导致作物减产。在未知碳添加量的情况下,很难预测有机质积累和损失的阈值。

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得益于呼吸传感器,我们可以直接测量土壤微生物呼吸

——测定土壤微生物活性;

——确定添加剂(营养物、污染物、土壤改良剂等)对微生物代谢能力的影响;

——确定微生物生物量。


样品

生物土壤有机调节剂,ID EN99


所需试剂

氢氧化钾(KOH),用于吸收二氧化碳。


分析仪器

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样品制备

调整土壤中的水分含量

土壤样品必须湿度适当,以使微生物得以活化。

•  如果土壤过干,微生物没有活性,土壤微生物转化过程停止。

•  如果土壤太湿,缺氧条件下发生厌氧呼吸,产生难闻的气味和对植物有害的酸。


检测土壤水分含量

一个简单方法,用手抓一把土壤,用力握紧,然后松开手。

•  如果土壤过干,就会散开,如果正常,就会保持原来的形状。

•  如果土壤过湿,当紧握时会有水分挤出。

根据情况,可以采取必要的措施,如加水或者覆盖干土。

当土壤湿度调整合适后,需要测定土壤干质量分数。


测量土壤体积

在200或250ml量筒中,加入100ml水,再加入50-100g土壤,加入土壤后的总体积减去水的体积就是土壤的体积。


分析过程

1、分析过程适宜的温度是20-25 ℃,我们将培养箱设置为25 ℃。

2、连接Wireless DataBox,并填写RESPIROSoft软件数据库。

3、在烧杯中称取50-200克混合均匀的土壤,并将其转移到1升测试瓶中。

4、在碱容器内添加适量的KOH。

5、将呼吸传感器安装在测试瓶上,并拧紧。

6、将测试系统放入已经达到设定温度的培养箱中。

7、等待至少3个小时,使测量系统达到设定温度,并产生初始压力升高的图形。

  • 初始压力升高是因为系统的加热膨胀所致。
  • 可以通过打开测试瓶来释放压力。

8、按下开始键,持续运行测试至少15天。


测试结果

根据公式计算游离气体积:

Vfg=Vtot-Vav-Vam-Vsm

Vfg:游离气体积,单位升;

Vtot:测试容器的总体积,不包括土壤、吸附剂容器和吸附剂的总体积,单位升;

Vav:吸收容器的体积,单位升;

Vam:吸收剂体积,单位升;

Vsm:土壤体积,单位升。


干土质量计算

根据公式计算土壤干重:

msd=msm×Wsd

msd:土壤干重,单位千克;

msm:土壤湿重,单位千克;

Wsd:湿土样品的干质量分数。


O2消耗率计算


根据公式计算O2消耗率:

RO2=32000·Vfg·ΔP/t·R·T·msd

RO2:单位质量干土壤的氧气消耗速率,mgO2/g/h;

32000:氧气的摩尔质量,mg/mol;

Vfg:游离气体积,L;

R:气体常数,83.14hPaL/mol/K;

T:测量温度,K;

msd:土壤干重,g;

ΔP:测得的压力差,hPa

t:测试时间,h


测试结果

VELP的RESPIROSoft软件自动采集压力传感器的压力值,并以生成图形显示,下图是100g样品在298K测试的曲线图。

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注意:当测试系统内压力下降到800mbar时,瓶内氧气消耗殆尽,需要打开测试瓶补充空气,然后再继续测试。

以下是对三个样品测试的结果。分析时间20天,选择这个时间是为了监测氧气消耗随时间的变化。

样品A

称样量:200g

T=298K

Vfg=0.965L

t=72h

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样品B

称样量:200g

T=298K

Vfg=1.037L

t=72h

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样品C

称样量:200g

T=298K

Vfg=1.081L

t=72h

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结论

从RSD%值(<3.29%)可以看出,VELP的土壤呼吸传感器系统是一种可靠的微生物土壤呼吸测定解决方案,这些分析具有出色的重复性。

得益于其创新的无线技术,传感器根据设定的数据传输频率,将压力值实时传输到无线数据盒,然后,通过直观的 RESPIROSoftTM界面显示结果,便于数据管理和结果对比。也可以将呼吸测量传感器连接到VELP Ermes云平台,便于远程查看和监测实验过程。


相关研究设备

实验室土壤呼吸及堆肥测量系统